流式細胞分選儀是一種精密儀器,主要用于對懸浮在液體中的細胞或其他微小顆粒進行快速、高精度的分析和分選。它基于流式細胞術原理,通過激光照射單個細胞,同時檢測細胞的物理、生化或分子特性,并根據預設參數自動分選出特定的細胞亞群。
流式細胞分選儀是一種基于流式細胞術原理的精密儀器,能夠對懸浮在液體中的細胞進行多參數快速分析和分選。其工作原理涉及流體動力學、光學檢測和電學分選等多個系統協同作用。
樣品制備與流體聚焦: 樣本細胞需制備成單細胞懸液,并通過壓力注入儀器的流動室;鞘液在高壓下從鞘液管噴出,包裹細胞形成鞘流,使細胞排成單列依次通過測量區(激光與液流垂直相交點),這一過程稱為流體動力學聚焦,確保細胞逐一通過激光束。
光學檢測與信號生成: 激光束(常用488nm波長)垂直照射細胞,細胞產生散射光和熒光信號:前向角散射(FSC)反映細胞大小,側向角散射表征細胞內部結構復雜度;熒光信號則通過多色熒光標記檢測,不同熒光染料發射的光被濾光片(如帶通、長通或短通濾光片)分離后,由光電檢測器轉換為電信號。
分選機制與電荷偏轉: 在分選模式下,流動室噴口處的壓電晶體高頻振動使液流斷裂為均勻液滴,每個液滴可能包含一個細胞;系統實時分析信號,對符合預設參數(如熒光強度)的細胞所在液滴施加正負電荷,未充電液滴落入廢液,帶電液滴在高壓靜電場中偏轉至指定收集器,從而實現高速分選。
系統集成與分選性能: 儀器由液流系統、激光光源、光學系統和分選系統集成,分選性能包括分選活性)、得率和純度,支持1-4路分選模式,適用于免疫學、細胞生物學等領域的細胞亞群分離。